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        GalaxyBio Cat:  产品名称检索:
        产品信息
         基因组提取
         质粒纯化
         凝胶回收
         PCR产物回收
         RNA提取
         PCR相关制品
         RT-PCR 相关
         荧光PCR相关
         DNA Markers
         克隆与表达载体
         感受态与菌株
         蛋白相关
         免疫诊断
         Vectors、Primers
         基因操作试剂盒
         修饰酶

        服务信息
         DNA解析(测序)服务
         DNA/RNA合成服务
         全基因人工合成服务
         基因工程操作服务
         定量PCR相关服务
         DNA芯片制作、解析服务
          新一代高速序列解析服务
         DNA解析(测序)服务
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              EZ-BDC 血液基因组DNA小量快提试剂盒------20分钟快提DNA

        GalaxyBio Code包装规格价格说明书购物车
        GM81050480元
        GM8202502000元

        EZ-BDC 血液基因组DNA小量快提试剂盒------20分钟快提DNA

        EZ-BDC
        血液基因组DNA小量快提试剂盒

        试剂盒内容
        50
        Cat:GM810
        250
        Cat: GM820
        Miniprep column
        50
        250
        2 ml microfuge tube
        50
        250
        溶液AP1 Buffer AP1
        25 ml
        130 ml
        溶液AP2 Buffer AP2
        6 ml
        30 ml
        溶液W1A Buffer W1A
        15 ml
        30ml×2
        溶液W2 Buffer W2
        15 ml
        30ml ×2
        溶液TE   Buffer TE
        10 ml
        10 ml×5
        说明书     Protocol
        1
        1

         
        贮存条件:
        室温,有效期2年。
        产品简介:     
        ※  GalaxyBio 公司与美国公司通力合作,由美方提供全方面技术、关键纯化材料,将核酸纯化等系列产品,在国内推广,实现了进口产品本土化生产。每种产品通过严格的技术把关,已达到进口产品的品质,而价格却是国产试剂盒的价位
        ※  采用独特的细胞裂解和血红素/蛋白沉淀技术,快速、方便,高得率、高纯度。可从100μl-250μl的血液中快速提取12μg高质量的基因组DNA。
          ※  提取的DNA可直接用于PCR/Real time PCR、限制性酶切、Southern blot、测序、mutant analysis和SNP等下游应用实验。
        注意事项:
        1. 如果从鸟类、两栖类或更低级的动物中提取基因组DNA,因其血液中红细胞有核,血液用量勿超过10μl,并加PBS 溶液将血样体积稀释到250μl后再按正常步骤操作。
        2. 制备管可结合多至25μg 的DNA。若需更多的DNA,可用0.5 ml 血来提取基因组DNA。将0.5 ml血样分成两管,每管250μl,按步骤1至4制备提取。将步骤4 所得到的上清混合,加到同一个制备管中结合DNA,最后用100-200μl 的Buffer TE洗脱DNA。
        3. Buffer AP1 和Buffer W1A 含刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套和眼镜,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,谨防吸入口鼻。若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水和生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。
        操作步骤:
        1.试验前准备及注意事项
         a. 试剂盒在第一次使用前请按试剂瓶标签说明在溶液W1A 溶液W2中加入无水乙醇,并做好标记;溶液使用后,避免长期暴露于空气中,用后请及时盖紧盖子,密闭保存。
           
         b. 使用前,请将水浴锅调整至70℃,并将溶液TE置于70℃预热。
        2. 加500 μl Buffer AP1 到1.5 ml 离心管中。
        3. 加200-250 μl 抗凝全血到Buffer AP1 中,用移液器来回吸注几次,以彻底溶解残留在吸头上的血液。盖紧离心管盖子,旋涡振荡10seconds。
        * 必须充分混合或旋涡振荡以确保完全释放基因组DNA。
        * 若从凝固的血或干血粉中提取基因组DNA,在研钵中收集凝固的血或干血粉,加入200 μl 含20 mM Tris,10 mMEDTA,(pH 8.5)的缓冲液,快速研磨30 s。加500 μl Buffer AP1,研磨充分后收集溶解产物到1.5 ml 离心管中, 50℃加热1 min。旋涡振荡溶解可能存在的血块,在冰浴中冷却后进入步骤3 的操作。
        4. 加100 μl Buffer AP2,旋涡振荡10seconds。12,000×g 离心10 min。
        5. 将制备管置于2 ml 离心管中,将步骤4中的上清加入到制备管中,12,000×g 离心1 min。
        * 如在制备管中仍残留溶液,适当升高离心速度,再离心一次,使所有溶液过滤到2 ml 离心管中。
        6. 弃滤液,将制备管置回到原2 ml 离心管中,加入700 μl Buffer W1A,室温放置2 min12,000×g 离心30seconds。
        * 确认在Buffer W1A 中已按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇。
        * 如在制备管中仍残留溶液,适当升高离心速度,再离心一次,使所有溶液过滤到2 ml 离心管中。
        7. 弃滤液,将制备管置回到原2 ml 离心管中,加入800 μl 已加无水乙醇的Buffer W2,12,000×g,离心1 min。
        * 确认在Buffer W2 中已按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇。
        8.(可选方案)将制备管置回到原2 ml 离心管中,加入500 μl Buffer W2 到制备管中,12,000×g,离心1 min。
        9. 将弃滤液,将制备管置回原2 ml 离心管,12,000×g 离心1 min。
        10.向硅胶膜中央加入80-200µl预热(70℃)Buffer TE,室温静置1 min(放入70℃水浴锅孵育5分钟,能够更好的洗脱),12,000×g 离心1 min 洗脱DNA。更大分子的基因组DNA完全溶解通常需更长时间。提取的基因组DNA可立即进行下游分子实验或-20℃保存
        DNA定量及纯度检测
        OD260值为1,相当于50ug/ml的双链DNA。也可以通过DNA Marker通过琼脂糖凝胶电泳半定量。OD260/ OD280比值一般为1.7-1.8,如果洗脱时不使用缓冲液,而使用去离子水,由于受PH值和离子浓度的影响,比值会偏低。
        常见问题
         
        可能原因
        解决方法
        未得到DNA
        溶液W1A和溶液W2使用前未加入无水乙醇
        请按试剂瓶标签说明在溶液W1A和溶液W2中加入无水乙醇,并标记。
        DNA产量低
         
         
        裂解不完全
        加入全血后请立即充分混匀。
        确保初始血液用量。
        确保旋涡振荡充分。
        血液样品中白细胞浓度较低
         
        将血液样品4,000rpm室温离心10分钟。离心后样品将分为三层,直接吸取20-50μl中间层作为初始材料进行操作。
        初始材料质量不高
        使用新鲜或冷冻的血液样品。
        洗脱缓冲液使用不当
        使用70℃预热的洗脱缓冲液。
        柱子堵塞
        过滤出去凝血块,
        有核细胞多,降低使用血量
        酶反应性不好
        残留盐分
        Buffer W1A和Buffer W2充分洗涤

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