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      Glue活化辣根过氧化物酶(B 型)---2小时快速标记抗原、抗体、多肽及化学小分子

GalaxyBio Code包装规格价格说明书购物车
WB220532ugx5200元
WB220532ugx10320元
WB221064ugx5200元
WB221064ugx10320元
MD0101mgx51500元
MD0101mgx102500元
MD0203mgx32200元
MD0203mgx53200元
MD0203mgx106000元
MD05050mg11000元
MD100100mg20000元

Glue活化辣根过氧化物酶(B 型)---2小时快速标记抗原、抗体、多肽及化学小分子

Glue
活化辣根过氧化物酶
(B 型)
货号
规格
(HRP/支)
数量
(支)
价格
标记抗体的量/支
(160KDIgG为标准)
Cat:WB2205
32ug
5
200
约5 ug/支
 
10
320
Cat:WB2210
64ug
5
200
约10ug/支
 
10
320
Cat:MD010
1mg
5
1500元
约100ug~0.5mg/支
10
2500元
Cat:MD020
3mg
3
2200元
约300ug~1.5mg /支
 
5
3200元
10
6000元
Cat:MD030
10 mg
1
2200元
约1~4mg /支
Cat:MD040
100 mg
1
20000元
约10~50mg mg/支
Cat:MD050
50 mg
1
11000元
约5~25mg mg/支
 
贮存条件:
低温运输,-20℃贮存,有效期一年。
生产日期:见包装
产品简介     
※  Galaxybio 公司研发的活化HRP,对优质辣根过氧化物酶次序偶联,再活化,使辣根酶富含活性基团。一经活化的HRP,极易和含氨基NH2的小分子或蛋白氨基NH2的共价结合。因此使用本方法标记物,具有标记率高、活性好、本底低及非常敏感等特点。敏感性一般是传统过碘酸法标记3~5倍。微量包装的活化HRP,特别适合科研用的昂贵抗体的标记。也适合抗体抗原活性的检测。
※  一步标记,简便快速。与待记抗原或抗体混合后(约12个小时过夜标记或37℃2小时。)
※  可以微量标记,节省昂贵的抗原抗体
※  无需透析,即时使用;
※  标记率极高,可大于95%;敏感性一般是传统过碘酸法标记3~5倍。
※  本试剂盒针对氨基进行标记,故只对含有氨基的分子。可以进行抗原或其他蛋白的标记。小分子的标记,如瘦肉精、DNA、多肽等等,标记时,如要提高HRP的利用率,可以加入过量的小分子,然后透析除去游离的小分子;如果要即时使用,参考蛋白抗原的标记,减少小分子的用量,从而减少游离的小分子。
※  本底远远低于其它方法。
注意事项:
1. 抗原抗体如果是存在于硫酸铵、甘氨酸或Tris缓冲液中,需以PBS缓冲液充分透析,也可以超滤离心管进行超滤;微量的含NH2 的小分子,会严重影响标记率。
2. 反应体系一般100μl~300ul /1mgHRP;太小,可能发生自身交联;也不要太大,太大会影响标记率
3. REAGENT Ⅲ 终止液,封闭残余活化基团。
4. 注意反应 pH值约维持在9.5左右。pH值太低,多加反应启动剂。
 
5.特别提醒,是后续试验中,酶标板条种类不同,本底差异特别大。当本底高时,以较高浓度蛋白溶液封闭的酶标板,同时把酶标稀释液的蛋白浓度加大。如果问题依旧存在,请联系我们技术咨询。
6 本试剂仅用于科学研究;
操作步骤
以1mg活化HRP,标记抗体为例(反应体系根据HRP的mg数相应增加)
        1. 准备待标记物:以蒸馏水或超纯水把待标记物溶解成约1mg/ml。
2. 取100ul抗体溶液(1mg/ml)转入REAGENT Ⅰ活化辣根氧化物酶。
※简短离心,使辣根过氧化物酶沉到管底,辣根酶管壁上的干粉HRP要完全冲洗溶解。
※总的反应体系控制在100ul/mg活化HRP左右,体系增大影响标记率。
※按照按mg活化HRP对应抗体100ug~500 ug、抗原50ug~250ug,HRP:X的分子mol比保持在30:15~1左右。
3. 以REAGENTⅡ调pH值至9.5左右(大约10ul,因抗体用的缓冲液的差别,量有所不同,但确保PH在9.0以上,可以多加REAGENTⅡ,并准确记录REAGENTⅡ的使用量,以备下一步用)。 37℃2小时、或4℃过夜。 
※检测PH的方法:取一新管尖,吸取标记物溶液,然后排尽液体,拿管尖点在PH试纸上,比对即可。
4. (备选步骤)加入微量硼氢化钠。(适合酶标物长期放置的,即时使用无需添加。取200ul的枪头,插入硼氢化钠粉末,在管尖处有看得见白色粉末,再转移到酶标物物,吹打溶解混匀即可)。
5. 加入REAGENTⅢ(约3倍体积的REAGENTⅡ。例如上一步用去REAGENTⅡ10ul,这一步加入REAGENTⅢ30~50ul。但确保酶结合物PH在7.0左右,可以多加REAGENTⅢ调整),混匀终止反应。
6. (备选步骤,甘油能更好稳定酶结合物活性)加甘油至50%,-20℃保存。
注:如果抗原(或抗体)为溶液状态,从步骤2开始操作。
特别提醒:后续试验中,酶标板条种类不同,本底差异特别大。当本底高时,以较高浓度蛋白溶液封闭的酶标板,同时把酶标稀释液的蛋白浓度加大,增加洗涤次数。如果问题依旧存在,请联系我们技术咨询。
推荐使用:包被了蛋白、或抗原、或抗体的酶标板的稳定,和稀释液的抗原或抗体的稳定,请购买本公司的相关产品。底物显色,本公司提供单组分TMB
和双组分TMB AB液,4~8℃可稳定数年。
 
附带缓冲液清单:
 
REAGENT Ⅰ活化辣根过氧化物酶
见包装
REAGENT Ⅱ反应启动剂
1.0ml(PH9.6)
REAGENT Ⅲ 终止液
1.0ml(PH7.0)
硼氢化钠
少许。
说明书
1份
 
 
 
Glue A型和B型活化辣根过氧化物酶标记特点
 
Glue A
Glue B
标记速度
快、1小时可完成标记
慢 、过夜
标记条件控制
稍难
容易
标记效果
稍低于B
较好
 
 

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